克隆(clone)一般是指无性繁殖细胞系，由单一个祖先细胞分裂繁殖而形成的一簇细胞系。在这个家族的所有成员中，如无发生突变其基因是完全相同的。
多克隆抗体(polyclonal antibody, pAb)是指用一种包含多种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清实际上是含有多种抗体的混合物，即多克隆抗体。
抗体发展历史
第一代抗体是传统的抗体制备方法即利用抗原免疫动物后获得抗体，称为多克隆抗体（polyclonal antibody) ;
第二代抗体是通过杂交瘤技术制备出针对抗原中某一抗原决定簇的抗体称为单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb);
第三代抗体是利用基因工程技术制备而来，称为基因工程抗体(genetic engineering antibody)。
多抗一般制备流程有以下这些：
1.兔子的准备
挑选健康的6周大小的新西兰大白兔两只（约2Kg），使其适应新的生活环境，至少稳定几天再进行首次取血.
预采血（作阴性参照用）：
将兔子小心的放入固定的架中,使兔子平静；
小心剃去兔耳上的毛以使血管清晰可见(也可不剃)；
如果有必要,可用小棉球沾酒精涂抹血管部位,使血管膨胀；
用注射器从耳静脉抽取约10ml血液(约5ml血清)；
小心抽出针头,适当按压伤口以免流血,然后用酒精棉球消毒伤口；
将收集的血液置于37`C灭活30min,最后置于4`C过夜使其凝结释放血清；
将凝结好的血液在10000r／min离心10min；h.收集上清，即为血清。
2.兔子的免疫
（1）淋巴结注射法：
在兔的两后足跖部皮下（或皮内）注射活卡介苗 50mg（每侧约0.30ml） 。7～10 天后，兔跖及腘肌淋巴结肿大；
于肿大的两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的IgG 乳化抗原 0.50ml(含 IgG 5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml)；
必要时，14 天后，重复步骤②一次；
再过 7 天后，于两侧淋巴结内各注射加有完全佐剂的 IgG 乳化抗原0.50ml（含IgG5mg/ml、青霉素 1 000U/ml、链霉素 1 000μg/ml） ；
5～7天后，耳静脉采血。测定血清效价。
（2）皮下多点注射法：
家兔两侧掌（跖内各注射含有完全佐剂抗原 0.10ml（IgG 含量5mg/ml） ；
7～10 天后，脊柱两侧多点（颈、胸、腰椎各两点、共 6 点）皮下注射含不完全佐剂5的抗原，每点 0.50ml；
7～10 天后，脊柱两侧重复注射一次；
7～10 天后试血。不合格者重复上一步骤。
（3）多途径联合注射法：
两侧掌（跖）内侧皮下注射含完全佐剂抗原 0.50ml（IgG 量为 5mg/ml） ；
14 天后，多点皮下注射含有不完全佐剂抗原；
7 天后，耳静脉注射不含佐剂的抗原 2ml；
测定血清抗体效价，不合格者重复上一步骤，并适当递增 IgG 量。
3.效价检测
2个参照:阴性参照为预取血血清，均以1抗起始浓度稀释(封闭稀释液);阳性参照为以前阳性血清
于96孔板中每孔滴加100ul，1ug/ml抗原，于4℃过夜，也可以37℃孵育2小时。
倒掉抗原溶液，每孔加入200ul的封闭液，4℃过夜或者37℃孵育2小时。
倒去封闭液，在吸水纸上拍打尽量吸干残留液体,用洗涤液洗板三次,每次尽量拍干残留液体,若要放置一段时间, 37℃烘干并用封口袋封好于-20℃存放。
取包被好的96孔板，第一孔加入阴性参照液100ul，第二孔加入阳性参照液100ul，第三孔加入1:500的待测抗血清，后续各孔在此基础上倍比稀释，于37℃孵育1 小时。
倒掉液体，用洗涤液洗板三次，拍干。每孔加入100ul的HRP标记的小鼠抗兔IgG（1：2000稀释），于37℃孵育45分钟。
倒掉液体，用洗涤液洗板三次，拍干。每孔加入100ul的TMB底物（Sigma 单组份TMB ）37℃孵育5—20分钟(根据颜色深浅来决定显色的时间)。
每孔加入50ul的终止液（2N H2SO4），在酶标仪上读取波长450nm处的吸光值。
抗体效价检测达到100万以上后可以对兔子进行终放血。抗体的纯化
4.抗体的亲和—亲和柱的制备
称取1mg CNBr-Sepherose 4B的琼脂糖凝胶加入2mmol／L的盐酸中，4`C过夜使其充分溶涨，可获得3ml溶涨胶。
将凝胶转移入纯化柱中，用约20ml 2mmol／L的盐酸洗介质3次。
用偶联缓冲液洗介质一次，因为活化基团在偶联缓冲液PH值下易水解，所以此步骤最好在几分钟内完成。
将溶解在5ml偶联缓冲液中的5-10mg的抗原加入凝胶中
室温下轻轻混合摇动2-4小时，或4`C过夜，如需测定结合效率此步骤结束后取少量溶液待测。用20ml的偶联缓冲液洗介质一次。
加入15m l 1% BSA 溶液室温下孵育2小时或4`C过夜。
用磷酸盐缓冲液洗涤介质3次以上，每次15ml以上 h.
抗原固相化完成，可用于纯化。
若不立即使用或者使用后，用20%的乙醇封存。
5.抗血清的纯化和保存
抗血清用PBS等体积稀释，5000-10000r／min离心15分钟，取上清.
用10倍体积的PBS清洗抗原亲和柱以平衡柱子。
将稀释好的抗血清10ml加入平衡好的柱子中。
室温下轻轻混合摇动2-4小时，或4`C过夜
用10倍体积的PBS清洗抗原柱，以洗去结合在柱子上的杂蛋白
用2倍体积的抗体洗脱液洗涤柱子，以得到特异性抗体
用10倍体积PBS平衡柱子
用20%的酒精封存柱子，4`C保存。
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